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第五章/第五节 北碚桑蚕种质量检验检疫技术

  北碚桑蚕种在繁育中严格执行国家《桑蚕原种》(GB19179-2003)、《桑蚕原种检验规程》(GB/T 19178-2003),农业行业标准《桑蚕一代杂交种》(NY326-1997)、《桑蚕一代杂交种检验规程》(NY/T327-1997)等规定的指标,在检验检疫上突出狠抓以下几个方面。

  一  催青卵及其死卵检查

  为了防止蚕种漏毒,充分利用带毒卵随催青日数的增加,检出率也随之提高,特别是转青之后检查转青死卵效果好。凡经卵传染微粒子病,其苗尾蚁带毒率高,种茧育均应对苗尾蚁及卵壳进行检查。原种逐张在每卵圈内侧随机挑取5粒以上蚕卵,每张原种累计挑取140粒以上,将抽取样品装入小纸袋,注明品种、批号、连纸号、季别。抽取样品放入30℃,相对湿度85%温箱中催青,待孵化蚁蚕自然死亡后检验。将纸袋内死蚁及卵壳放于乳钵内,每孔不超过100头(粒),先用乳棒磨碎卵和蚁蚕,再用吸管滴入4~10滴2%KOH溶液研磨。按乳钵序号点板制片2套,由2名镜检员对检,每个样看20个视野以上,做好记载。发现有微粒子的整区(户、张)淘汰。

  二  纯度调查

  为确保原种以上级别蚕种的纯度,保持品种的优良特性。在五龄盛食期和上蔟采茧后。原原种和原种每批逐区、普种每批抽5%饲育区(原蚕户),调查蚕体色、体形、斑纹、茧形、茧色,选出不符合该品种固有性状的个体。

  品种纯度(%)=符合该品种性状的个体数/调查总头数×100

  原原种和原种、普种的种蚕(茧)发现三眠蚕(茧)、五眠蚕(茧)及不符合该品种性状的,作个体淘汰。品种纯度低于95%且属于上一代遗传质量问题的,整批(区、户)淘汰,不得参与制种。

  三  预知检查

  为了在饲育中或制种前及时了解各饲育区(户)是否感染微粒子病孢子。通过在卵、幼虫、蛹、蛾等不同发育阶段抽样进行检验,提前掌握情况以便采取相应防治措施。预知检查主要是对蜕皮壳、迟眠蚕、弱小蚕、蚕粪、蔟中不结茧蚕、病态蛹蛾等进行检查。一、二龄迟眠蚕分饲育区(户)全包全检,三、四龄迟眠蚕、弱小蚕、病态蚕每箔至少1包,每包不得少于5~10头,注明品种、批号、饲育区(户)。送检样品放在29℃温度和85%的相对湿度环境中保护2~3 d,将小蚕整体、大蚕取中肠放置乳钵中,先磨碎后再加少量2%KOH溶液研磨后制样镜检。在上蔟后取疑为微粒子病病蚕或不结茧蚕,撕开病体或直接用夹子拉出丝腺观察,若呈乳白色或黄浊色不透明,有不规则泡状突起,则为微粒子病。若病变不明显,可加少量2%KOH溶液磨碎制样镜检。将蚕蛹浸在70℃热水中,经7~10 s,解剖取出中胃磨样,加少量2%KOH溶液,磨碎制样镜检。从每一饲育批(户)中任意随机抽取早、中、晚熟蚕单独上簇结茧,在温度29℃,相对湿度85%的环境中促进发蛾,发蛾后逐蛾加少量2%KOH溶液磨碎制样镜检。检出有微粒子孢子的整区(户)淘汰。

  四  母蛾微粒子检验

  家蚕微粒子病是由微孢子原虫感染家蚕而引起的一种严重危害甚至毁灭蚕业生产的传染性蚕病。该病的传染途径主要有两条,一是经口食下传染、二是经卵胚种传染。通过对母蛾微孢子原虫的检验,可以判断蚕种是否带有微孢子原虫。因此在母蛾检验中蚕种必须与母蛾完全对应。

  原种以饲育批为检验批,母蛾采取逐张全部对号分格装盒的方法。蛾盒规格为:纸质、28格(标明序号)、长275px、宽200px,高50px。蛾盒上应标明生产单位、品种名称、批次、蛾盒号。蛾盒号应与蚕种编号一致,连纸上有空圈或产卵后母蛾爬失的卵圈,需在蛾盒上和卵圈旁注明空圈符号。

  普种因生产量大,对全部母蛾进行检验有一定困难。采用抽样检验。从总体中抽出一定量的个体组成样本,通过对样本的检验来推断总体,这种抽样检验虽然不能够达到绝对正确,但是通过合理的抽样设计和检验,其信赖度在98.5%以上。

  一检二检蛾盒由检验室负责分样。检验时,先抽取一检用蛾盒,在送检蛾盒中,从头尾开始,间隔一定号数,从两头向中间抽取,直至抽足数量为止,余下作为二检蛾盒,一检和二检的样本母蛾必须分别能代表整个检验批。

  五  卵量及良卵率检验

  为了科学评判北碚桑蚕种质量。在散卵种整理装盒的同时,每批北碚桑蚕种抽样20g,每个样本抽样卵2.00g,混合后平分成两份,其中一份供调查,另一份留样备查。在供调查的10g卵中,称取3个1.00g样卵,分别调查良卵粒数和不良卵粒数,取平均数,计算良卵率、每盒良卵粒数。

  良卵率(%)=(样卵良卵粒数/样卵总粒数)×100

  每盒良卵粒数=平均每克良卵粒数×每盒平均克数

  六  实用孵化率调查

  从已经调查过良卵数的3.00g样卵中称取两个1.00g样卵,进行试催。复式冷藏越年种中间感温后进行,单式冷藏越年种在用种前进行,浸酸种浸酸后进行。试催条件,春期按简化催青标准催青,夏秋期催青开始第1~4d 24℃保护,其他条件与简化催青标准相同。样卵孵化后,逐日统计孵化卵数,计算实用孵化率。

实用孵化率(%)=最大二日孵化卵数/调查卵总数×100

实用孵化率(%)=连续2日最大孵化头数/调查良卵数×100

  七  杂交率检验

  为了保证蚕种杂交彻底,充分发挥杂交优势。按蚕种批次,散卵种从样卵中称取0.5g、平附种从样张中抽取250px²连纸的蚕卵进行催青、饲养,不得淘汰各龄迟眠蚕和弱小蚕,在四龄期根据斑纹或者在茧期根据茧形统计纯种头数,计算杂交率。

  杂交率%={(调查总头数-纯种头数)/调查总头数}×100

  杂交率低于95%,判为不合格,整批淘汰。